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          胎牛血清白蛋白如何提取
          点击次数:116      发布时间:2021-11-19

          胎牛血清白蛋白(BSA)博鱼体育竞技|官方推荐博鱼体育竞技|官方推荐,又称第五组分博鱼体育竞技|官方推荐,是牛血清中的一种白蛋白,包含583个氨基酸残基博鱼体育竞技|官方推荐博鱼体育竞技|官方推荐,分子量为66.430 kDa博鱼体育竞技|官方推荐,等电点为4.7博鱼体育竞技|官方推荐。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用,例如在western blot中作为Blocking agent;在酶切反应缓冲液中加入BSA,通过提高溶液中蛋白质的浓度,对酶起辈┯闾逵杭紎官方推荐;ぷ饔?博鱼体育竞技|官方推荐。防止酶的分解和非特异性吸附博鱼体育竞技|官方推荐,能减轻有些酶的变性,能减轻有些不利环境因素如加热,表面张力及化学因素引起的变性博鱼体育竞技|官方推荐。是胎牛血清中的一种球蛋白博鱼体育竞技|官方推荐博鱼体育竞技|官方推荐博鱼体育竞技|官方推荐博鱼体育竞技|官方推荐,一般获取胎牛血清白蛋白,常常运用的方法是加热法。

          下面一起和上海研域生物来看看是怎样获取胎牛血清白蛋白的博鱼体育竞技|官方推荐!

          ELISA实验

          一博鱼体育竞技|官方推荐、所需材料

          胎牛血清取近郊屠宰场博鱼体育竞技|官方推荐,以柠檬酸三钠为抗凝剂博鱼体育竞技|官方推荐博鱼体育竞技|官方推荐,血液搜集后随即分别出血浆备用博鱼体育竞技|官方推荐博鱼体育竞技|官方推荐。需要的试剂有血清白蛋白博鱼体育竞技|官方推荐;溴jia酚氯;醋酸纤维素薄膜博鱼体育竞技|官方推荐,别的试剂均为分析纯博鱼体育竞技|官方推荐博鱼体育竞技|官方推荐?博鱼体育竞技|官方推荐;袢√ヅQ灏椎鞍仔枰急?LG-6型大容量冷冻离心机博鱼体育竞技|官方推荐,DF-C型电泳仪博鱼体育竞技|官方推荐博鱼体育竞技|官方推荐,UV-754型紫外可见分光光度计,PHS-2型酸度计博鱼体育竞技|官方推荐。

          二博鱼体育竞技|官方推荐博鱼体育竞技|官方推荐、具体方法

          白蛋白含量测定 选用溴jia酚氯法,以胎牛血清白蛋白为规范. 白蛋白纯度的测定 选用醋酸纤维素薄膜电泳法博鱼体育竞技|官方推荐博鱼体育竞技|官方推荐。吸光度值的测定 用分光光度计直接测定蛋白质溶液在波长为403 nm处的光吸收值,然后折算成浓度为10 g/L时牛血清白蛋白的光吸收值博鱼体育竞技|官方推荐博鱼体育竞技|官方推荐,用A403表明博鱼体育竞技|官方推荐。

          胎牛血清白蛋白的生产工艺 新鲜抗凝牛血用LC-6型大容量离心机(3 000 r/min×30 min)离心分别出血浆博鱼体育竞技|官方推荐博鱼体育竞技|官方推荐,加一定量的蒸馏水稀释博鱼体育竞技|官方推荐,再参与恰当的稳定剂和蛋白沉淀剂博鱼体育竞技|官方推荐博鱼体育竞技|官方推荐,然后按下述方法进行试验处理:

          1.不一样pH值溶液对白蛋白的收率和质量的影响 在其它条件固定的情况下博鱼体育竞技|官方推荐,试验不一样pH值对白蛋白的收率博鱼体育竞技|官方推荐、纯度及A403值的影响博鱼体育竞技|官方推荐。

          2.不一样加热保温时间对白蛋白的收率和质量的影响 在选定的pH值和其它条件固定的情况下,试验不一样加热保温时间对白蛋白的收率博鱼体育竞技|官方推荐、纯度及A403值的影响博鱼体育竞技|官方推荐。

          3.不一样稀释倍数对白蛋白的收率和质量的影响 在选定的pH值和保温时间及其它条件固定的情况下博鱼体育竞技|官方推荐博鱼体育竞技|官方推荐博鱼体育竞技|官方推荐,试验不一样稀释倍数对白蛋白的收率博鱼体育竞技|官方推荐博鱼体育竞技|官方推荐、纯度及A403值的影响。

          4.不一样加热温度对白蛋白的收率和质量的影响 在其它条件选定的情况下,试验不一样加热温度对白蛋白的收率博鱼体育竞技|官方推荐博鱼体育竞技|官方推荐、纯度及A403值的影响。


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